<noframes id="vzprb"><span id="vzprb"></span>

<noframes id="vzprb">

<noframes id="vzprb"><address id="vzprb"></address>
<noframes id="vzprb"><form id="vzprb"><th id="vzprb"></th></form>
<address id="vzprb"><address id="vzprb"></address></address>
    <em id="vzprb"></em>
    當前位置:首頁 > 科研服務 > 蛋白/核酸相互作用 > DNA-蛋白互作 > DNA pull down
    實驗簡介買此服務

    DNA pull down實驗原理


    先將含脫硫生物素的DNA pulldown探針結合到鏈霉親和素Beads上,再將DNA-Beads和細胞裂解液孵育,這樣DNA結合蛋白便一起吸附在Beads上。洗滌掉未結合的蛋白后,再用洗脫液將DNA結合蛋白從Beads洗脫下來,得到DNA pull down產物。DNA-protein復合物既可以用WesternBlot檢測已知蛋白,也可以用質譜鑒定未知蛋白。


    添加技術員微信溝通實驗
    18927549347






    DNA pull down實驗步驟流程


    DNA pull down實驗技術服務步驟 dna pulldown WB實驗平臺公司




    應用領域


    DNA pull-down MS實驗服務費用價格供應商





    DNA pull-down技術服務應用背景



    DNA pull-down以感興趣的DNA序列為中心,尋找與該序列結合的蛋白質,最常見的應用是尋找某特定基因啟動子區域的轉錄因子。


    啟動子通常位于結構基因5'端上游,含有RNA聚合酶特異性結合和轉錄起始所需的保守序列。


    轉錄因子也稱為反式作用因子,是一種DNA結合蛋白,它能夠與真核基因的順式作用元件(如啟動子、增強子等)特異性結合來激活或抑制基因表達。轉錄因子有4個主要結構域:DNA結合域決定了轉錄因子的特異性,轉錄調控域(包括激活域或抑制域)決定了轉錄因子的功能,寡聚化位點使不同轉錄因子間發生相互作用,核定位信號控制轉錄因子進入細胞核。


    一個基因的啟動子通常會結合多種轉錄因子,尋找啟動子序列的特異轉錄因子,有助于我們理解這些啟動子下游的功能基因是如何被調控的。








    DNA pulldown技術實驗服務—客戶案例


    DNA pull down技術服務公司實驗結果高分論文

    lncRNA LAMP5-AS1通過調控DOT1L甲基轉移酶活性促進MLL白血病發展



    研究背景

    鼻咽癌的已有研究指出,氯離子通道-3(CLC-3)是一種有應用前景的癌癥生物標志物;但是,CLC-3能否作為胃癌的預后生物標志物以及它在胃癌中的作用機制卻鮮有報道。



    研究路線

    1

    免疫組化實驗表明CLC-3在胃痦組織中高表達,且與患者不良預后有關

    2

    RNA-seq分析和細胞實驗發現敲除CLC-3抑制細胞增殖和遷移,且影響了PI3K/Akt信號通路的很多基因

    3

    雙熒光素酶實驗確定了CLC-3啟動子的活性區域

    4

    DNA pull down MS實驗找到了CLC-3啟動子活性區域的潛在結合蛋白XRCC5

    5

    體內DNA探針檢測ChIP-PCR實驗都確定了XRCC5蛋白可以結臺CLC-3啟動子

    6

    免疫組化實驗表明XRCC5和CLC-3的表達呈正相關,且兩者高表達指示患者預后不良

    7

    基因表達/敲除和細胞功能實驗結果顯示CLC-3的表達和功能受XRCC5的調節

    8

    CoIP結合質譜實驗篩選到了XRCC5的互作蛋白PARP1,體內DNA探針檢測發現PARP1也可以與CLC-3啟動子結合,XRCC5和PARP1協同調控CLC-3的表達和功能

    9

    小鼠移植瘤實驗表明CLC-3在體內可也以被XRCC5調控,影響腫瘤生長



    研究結論

    CLC-3過表達是胃癌不良預后的生物標志物,并且CLC-3可能通過PI3K/AKT信號通路調節細胞增殖和遷移。胃癌中CLC-3過表達的調控機制是:XRCC5結合CLC-3啟動子區并增加其啟動子活性,并且與PARP1相互作用在轉錄水平正調控CLC-3的表達。



    客戶文獻

    Gu Z.Y. et al: Overexpression of CLC-3 is regulated by XRCC5 and is a poor prognostic biomarker for gastric cancer. Journal of Hematology & Oncology. 2018. (IF=17.388).




    熱門推薦


    蛋白組/代謝組實驗
    ? iTRAQ 定量蛋白質組學

    ? Label Free 實驗檢測服務itraq,label free,lc-ms/ms質譜鑒定,DIA實驗,廣泛靶向代謝組學

    ? LC-MS/MS 蛋白質譜鑒定

    ? DIA 全息掃描定量蛋白質
    廣泛靶向代謝組學

    蛋白/核酸相互作用實驗
    ? GST pull down

    ? RNA pull downRNA pulldown,DNA pulldown,GST pulldown.png

    ? DNA pull down

    ? Co-IP 免疫共沉淀

    ? TAP-MS串聯親和純化

    分子細胞生物學實驗
    ? 基因調取/合成 (cDNA克隆)

    ? 熒光定量PCR (qPCR)分子細胞生物學實驗.jpg

    ? 載體構建實驗服務

    ? miRNA靶基因驗證
    慢病毒包裝

    科研產品
    哺乳動物細胞表達載體慢病毒表達載體 慢病毒干擾載體 人cdna克隆庫.jpg

    ? 人cDNA克隆庫

    ? 慢病毒表達載體

    ? 慢病毒干擾載體

    抗體工程服務
    單克隆抗體測序抗體測序 抗體從頭測序 抗體表達.jpg

    ? 抗體從頭測序

    ? 抗體表達服務

    ? 重組抗體表達

    實驗試劑盒
    ? RNA pull down 試劑盒RNA pulldown試劑盒 GST pulldown試劑盒 coip試劑盒 flag試劑盒 .jpg

    ? GST pull down 試劑盒

    ? COIP 試劑盒

    ? Flag 試劑盒




    輝駿實力

    輝駿DNA-pull down實驗技術外包服務

    4899+客戶已添加微信獲取實驗優惠!

    輝駿生物提供的DNA pull down實驗技術服務分以下兩種:

    1. DNA Pull down WB,用于檢測目標DNA序列與某樣本中的待測蛋白是否存在相互作用;

    2. DNA Pull down MS,用于篩選目標DNA序列與某樣本中的哪些蛋白具有相互作用。

    DNA pull down檢測服務
    服務項目服務內容結果交付實驗周期客戶提價格
    DNA pull-down WB制備DNA探針探針電泳圖5-6周

    1、實驗樣本

    2、含有目標DNA序列的質粒模板及測序文件

    3、待測蛋白抗體

    4、實驗信息表(樣本信息、抗體信息、目標DNA和待測蛋白序列)



    點擊詢價


    Western blot檢測待測樣本中的待測蛋白Western blot檢測圖

    DNA pull down捕獲目標DNA片段及其結合蛋白

    (2組:實驗組、對照組)
    RNA pull down實驗報告
    Western blot檢測DNA Pull down產物中的待測蛋白Western blot檢測圖
    DNA pull-down MS
    制備DNA探針探針電泳圖8-9周

    1、實驗樣本

    2、含有目標DNA序列的質粒模板及測序文件

    3、實驗信息表(樣本信息、目標DNA序列)





    點擊詢價






    DNA pull down捕獲目標DNA片段及其結合蛋白

    (2組:實驗組、對照組)
    pull down實驗報告
    SDS-PAGE評估DNA pull down產物中的蛋白含量和數量
    SDS-PAGE銀染檢測圖
    LC-MS/MS定性檢測pull down產物的蛋白、篩選實驗組獨有蛋白(潛在互作蛋白)質譜檢索表格、互作蛋白篩選表格、檢測報告
    針對互作蛋白做生物信息學分析(GO、KEGG pathway、String)生物信息學分析結果和報告1周


    添加技術員微信溝通實驗
    18927549347





    DNA pull down實驗服務優勢*輝駿生物


    1

    十年服務經驗,客戶成果發表在Nature Methods,Oncogene,Cell Research等高水平期刊上。

    2

    對圍繞DNA結合蛋白開展的整體課題提供全方位指導,包括上下游實驗設計和結合蛋白的多方法驗證等。

    3

    自有蛋白質組學平臺,對dna pull down產物這類微量蛋白的質譜鑒定有十足的把控能力,對后續的生物信息分析有獨到的見解

    4

    售后技術支持將一直保持到客戶發表文章,確??蛻舭残倪M行下游實驗及投稿。





    DNA pull down實驗技術服務樣本要求

    1. 送樣量要求

    樣本類型DNA pull down WB建議送樣量DNA pull down MS建議送樣量
    動物細胞3*10e7個細胞/組(約3個10cm皿)5*10e7個細胞/組(約5個10cm皿)
    動物組織1g/組2g/組
    植物葉片2g/組4g/組
    植物根或果實4g/組8g/組
    菌體50ul菌體沉淀/組100ul菌體沉淀/組

    ▲注意:這里列出的均為每組樣本的送樣量,如果實驗和對照組用的樣本一致,此樣本量*2。詳細送樣指南可聯系輝駿生物客服或銷售索取。

     

    2. 樣本保存和運輸要求

    (1)樣本用PBS清洗干凈后,離心去掉液體,先放入液氮中速凍,再轉移至-80℃冰箱中保存;

    (2)樣本一定要做好標記,應用油性防凍記號筆或標簽紙在管上注明樣本名稱或編號;

    (3)樣本較多或需要分批做,要將樣本分裝;

    (4)干冰取樣/運輸;需要至少在送樣前一天通知我方。

     



    DNA pull-down實驗服務結果示例


    DNA pull down實驗技術服務結果分析

    DNA Pull down ms:SDS-PAGE銀染檢測圖


    DNA pull down技術服務公司價格

    DNA pull down-ms:質譜檢索表格(部分展示)





    DNA-pull down技術服務客戶文章


    1637896170298984.png Chen R. et al: Lnc-GD2H Promotes Proliferation by Forming a Feedback Loop With c-Myc and Enhances Differentiation Through Interacting With NACA to Upregulate Myog in C2C12 Myoblasts. Front Cell Dev Biol. 2021, IF=6.684.

    【研究內容】:本研究通過雙熒光素酶,ChIP,DNA pull down和RNA pull down,RIP等實驗發現lnc-GD2H在肌肉再生中的作用:在成肌細胞增殖過程中,c-Myc蛋白與lnc-GD2H啟動子結合并調節其轉錄,促進成肌細胞增殖;在成肌細胞分化過程中,lnc-GD2H與成肌細胞分化相關蛋白NACA相互作用,抑制其在Myog啟動子的富集,減輕NACA對Myog的抑制作用,促進Myog表達和成肌細胞分化。

    使用相關技術:DNA pull down檢測、DNA-pull down探針制備實驗、DNA pull-down質譜實驗服務



    1637896170298984.png

     Ma Y. et al: New insights into the proteins interacting with the promoters of silkworm fibroin genes. Scientific Reports. 2021, IF=4.379.

    【研究內容】:本研究報道了家蠶中調控絲素蛋白編碼基因所必需的啟動子相互作用蛋白(PIP),包括絲素重鏈(Fibre H)、絲素輕鏈(FiBL)和一個25kD的多肽蛋白(P25)。作者通過DNA pull down結合質譜分析鑒定與FibH、FiBL和P25啟動子區域相互作用的蛋白質,研究首次提供了與絲素基因啟動子相互作用的蛋白質的深入圖譜,有助于更好地理解絲蛋白的合成調控。

    使用相關技術:DNA pull-down ms、DNA pulldown技術服務





    DNA pull down實驗技術參考文獻


    1. Wang R.H. et al: A requirement for breast-cancer-associated gene 1(BRCA1) in the spindle checkpoint. PANS. 2004,IF=9.58.
    【研究內容】:研究表明BRCA1缺陷型細胞的有絲分裂受到影響,存在紡錘體檢查點缺陷。作者檢測和紡錘體檢查點密切相關的幾個基因,發現BRCA1缺陷型Mad2基因表達水平變化明顯,由此推測BRCA1是通過影響Mad2的表達,從而影響有絲分裂的。DNA pull down及ChIP-qPCR實驗證實了BRCA1可以和Mad2啟動子結合,進一步研究發現BRCA1確實上調Mad2的表達,從而影響有絲分裂。
    使用相關技術:dna pull down檢測、DNA-pull down探針、DNA pull down質譜


    2.  Charles E. Foulds.et al: Proteomic Analysis of Coregulators Bound to ERα on DNA and Nucleosomes Reveals Coregulator Dynamics.Mol Cell.2013,IF=15.584.
    【研究內容】:轉錄輔助調節因子(COR)在基因的激活或抑制中起著核心作用,研究者使用生物素-DNA pull down實驗和IP結合質譜分析的方法,鑒定與E2配體ERα結合的協同調節子,提取出至少17個轉錄輔助調節因子。研究發現組蛋白H3K4三甲基標記(H3K4me3)刺激ERα介導轉錄的機制;H3K4me3模板在ATP和AcCoA存在的情況下促進特定的COR動力學。
    使用相關技術DNA pulldown技術服務、DNA pulldown WB、DNA pulldown MS實驗



    4899+客戶已添加微信獲取實驗優惠!

    標簽:

    上一篇:雙熒光素酶檢測啟動子活性

    下一篇:暫無

    你可能感興趣的實驗

    電子郵箱

    service@fitgene.com

    聯系電話

    020-32053431 / 400-699-1663

    聯系地址

    廣州市黃埔區科學城廣州國際企業孵化器D506

    微信咨詢

    微信掃碼一對一咨詢

    服務熱線
    4006991663
    在線客服 返回頂部
    天天躁日日躁狠狠躁日日躁黑人,亚洲情A成黄在线观看动漫尤物,无码无套少妇毛多18P,欧美最猛黑人XXXX黑人猛交又色又爽又黄的视频免费看 手机看片AV无码永久免费 国产A片 无遮挡高潮床戏视频 久久综合无码中文字幕无码 同性男男黄G片免费网站 公交车被CAO到合不拢腿 国产成人亚洲综合色影视 最近手机高清中文字幕大全 国产大陆亚洲精品国产 娇妻被生人粗大猛烈进出高潮 亚洲AV综合色区无码三区 久久精品亚洲中文字幕无码 俱乐部换娇妻大杂交 国产大陆亚洲精品国产 被两个老头咬住吃奶野战 公交车挺进朋友人妻的身体里 国产精品国产三级国产AV 人妻互换共享4P闺蜜疯狂互换 欧洲熟妇色XXXX欧美老妇多毛 羞羞视频 韩国精品无码一区二区三区 男女猛烈无遮激烈太紧动态图 亚洲情A成黄在线观看动漫尤物 午夜无码国产理论在线 无码亚洲成A人片在线观看 么公的又大又深又硬想要 午夜无码国产理论在线 久久久久久精品无码 欧美人与动人物牲交免费观看