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輝駿生物的GST
pull-down試劑盒能夠高效調取GST融合蛋白在各類樣本中的互作蛋白。在GST
pull-down實驗前,先通過基因工程技術手段將目標基因和GST基因序列連接起來,并導入大腸桿菌中進行原核表達和純化,之后融合蛋白通過GST標簽與固相化在載體上的GTH(
Glutathione)親和結合。接下來,當樣本中與融合蛋白有相互作用的蛋白通過層析柱時或與此固相復合物混合時就可被吸附而分離。
試劑名稱 | 體積 | 保存條件 |
GST標簽純化樹脂 | 1mL | 4 ℃ |
裂解緩沖液(PH 7.4) | 40mL | 4 ℃ |
漂洗緩沖液(5×) | 30mL | 4 ℃ |
洗脫緩沖液(PH 2.0) | 1mL | 4 ℃ |
1、GST融合蛋白與樹脂親和力強,可以高效純化目標蛋白及其互作蛋白;
2、適用范圍廣,可用于動物組織、細胞、植物組織、微生物等各種類型的樣本;
3、操作簡便,周期短。
1. 通過原核表達系統表達帶有GST標簽的融合蛋白;
2. 在細菌上清液中加入GST標簽親和純化樹脂,4 ℃孵育2 小時;
3. 將待測樣本裂解液加入上述體系中,4 ℃孵育過夜;
4. 漂洗、洗脫得到目標蛋白及其互作蛋白復合物。
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